Меню
Главная
Авторизация/Регистрация
 
Главная arrow География arrow ГЕНЕТИКА В 2 Ч. ЧАСТЬ 1
Посмотреть оригинал

Генетический контроль синтеза ДНК

Появление в 1953 г. модели двойной спирали ДНК послужило стимулом к зарождению новой науки - молекулярной биологии. Однако потребовалось пять лет, прежде чем были получены экспериментальные подтверждения модели Уотсона-Крика в работах М. Мезелсона и Ф. Сталя. В этих экспериментах показано, что репликация ДНК происходит в точном соответствии с предложенной моделью, т. е. полуконсервативно: в результате каждая дочерняя молекула ДНК состоит из одной интактной (консервативной) цепи, полученной от родительской двойной спирали, и одной вновь синтезированной цепи. Гипотетические механизмы репликации ДНК: консервативный (при котором родительская ДНК полностью сохраняется, а дочерние молекулы ДНК синтезируются заново) и дисперсный (при котором обе дочерние молекулы ДНК синтезируются заново, а родительская молекула распадается на нуклеотиды), - не совместимые с моделью двойной спирали, не были выявлены ни в одном случае.

Для того чтобы определить, каким из названных способов реплицируется ДНК, был использован метод, позволяющий отличать дочерние молекулы от родительских (рис. 5.11). М. Мезелсон и Ф. Сталь выращивали Е. coli на среде, содержащей в качестве источника азота тяжелый изотоп l5N, который включался в состав ДНК и служил меткой. Для того чтобы пометить изотопом I5N практически всю ДНК бактериальной клетки, достаточно культивировать Е. coli на такой среде в течение 12 поколений. Молекулы, содержащие 15N, можно отличить от молекул, содержащих более легкий обычный изотоп (I4N), по плотности, т. к. у ДНК с 15N масса одного нуклеотида больше, чем у обычной ДНК. Молекулы ДНК с различной плотностью можно разделить ультрацентрифугированием в градиенте плотности хлористого цезия.

Ауторепродукция молекулы ДНК, в которой полинуклеотиды помечены тяжелым азотом (N)

Рис. 5.11. Ауторепродукция молекулы ДНК, в которой полинуклеотиды помечены тяжелым азотом (15N): а - родительская молекула ДНК, в которой звездочками обозначены атомы 15N;

б - «гибридные» молекулы первого поколения, в которых одна нить (родительская) содержит l5N, другая (вновь синтезированная) - обычный изотоп 14N; в - четыре молекулы второго поколения, две из них (справа и слева) содержат ,5N в нитях, происходящих от исходной родительской ДНК, а две другие молекулы (в середине) - новые нити полинуклеотидов, не содержат ,5N

Результаты ультрацентрифугирования показати, что наибольшей плотностью обладают молекулы ДНК, содержащие тяжелый изотоп ,SN во всех основаниях обеих цепей полинуклеотидов (рис. 5.11, а средней - гибридные молекулы, содержащие в одной цепи I5N, а в другой - ,4N (рис. 5.11,

  • б) , и, наконец, минимальной - молекулы, включающие только ,4N (рис. 5.11,
  • в) . Все эти типы молекул были обнаружены в соответствии с ожидаемой последовательностью синтезов ДНК после переноса бактерий с молекулами ДНК, меченными lsN, на среду с азотом 14N.
 
Посмотреть оригинал
Если Вы заметили ошибку в тексте выделите слово и нажмите Shift + Enter
< Предыдущая   СОДЕРЖАНИЕ   Следующая >
 

Популярные страницы