Меню
Главная
Авторизация/Регистрация
 
Главная arrow Агропромышленность arrow ФИЗИОЛОГИЯ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ МЛЕКОПИТАЮЩИХ
Посмотреть оригинал

ЦИТОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ПРИ ПРОГНОЗИРОВАНИИ ЛАКТАЦИИ У БЕРЕМЕННЫХ

При микроскопическом анализе молозива беременных женщин в предлактационный период был выявлен ряд характерных различий в его клеточном составе. Для беременных, которые в последующем полноценно лактирова- ли, характерно наличие в мазке значительного или умеренного количества молочно-жировых шариков, в большинстве случаев в виде конгломератов, имевших вытянутую форму. В мазке в 32,3 ± 8% случаев отмечается наличие значительного количества лейкоцитов и соматических клеток. У 35,3 ± 8,2% женщин данной группы выявляется единичные клетки. У 26,5 ± 7,6% беременных женщин в мазке выявляются отдельные капли жира, в основном средних размеров. Значительное количество клеток содержалось у 14,7 ± 6,1% беременных. Таким образом, в 46,1 ± 8,6% случаев по цитологическому составу секрет молочной железы беременных характеризуется наличием значительного количества эпителиальных клеток и лейкоцитов, находящихся в состоянии агрегации. Следует обратить внимание, что в 5,9 ± 4% случаев мазки не содержат молочно-жировых шариков. Клеточный состав секрета молочной железы достаточно скуден. Встречаются только отдельные лейкоциты, именно в этих случаях в последующем выявлена гипогалактия.

Анализ цитотоксической активности клеток молозива и молока. Сопоставляя данные морфологического исследования развивающейся молочной железы с результатами цитологического анализа особенностей ее секрета на начальных этапах лактации, нельзя не отметить то обстоятельство, что цитотоксическая активность лимфоидных клеток, обеспечивающих уничтожение «измененных», мешающих продвижению секрета клеток, находится в соответствии с интенсивностью секреторного процесса. Отторгаемые в этот период клетки могут являться инициаторами аутоиммунных реакций в ходе своеобразного асептического воспалительного процесса. Важно подчеркнуть, что в случае подавления иммунных реакций организма при развитии токсикоза беременных происходит нарушение функционирования и молочной железы. Аналогичное явление удалось наблюдать в экспериментальных условиях — при регионарной лимфаденэктомии, рентгеновском облучении, действии антилимфоцитарной сыворотки и других воздействий, снижающих иммунные реакции организма. С усилением цитотоксических свойств лимфоидных клеток связано, очевидно, и увеличение адгезии клеток, которое приводит к образованию своеобразных агрегатов. Это явление позволяет объяснить отмеченный нами феномен «розеткообразования», наблюдаемый непосредственно в секрете молочных желез.

Методика исследования. Клеточный состав молока лак- тирующих женщин мы изучали на мазках, приготовленных из капли секрета молочной железы в разные сроки после родов. После высушивания на воздухе мазок фиксировали 10 минут в парах формалина. Промыв препараты дистиллированной водой, клетки окрашивали 0,1%-ным раствором метиленового синего. Оценивая клеточный состав секрета молочных желез родильниц, мы должны отметить, что участие морфо-некротических процессов в формировании альвеолярно-протоковой системы существенно сказывается на цитологических особенностях молозива и зрелого молока и проявляется в темпах прохождения моло- зивного периода. При достаточной лактации весьма характерным признаком является массированный выход лейкоцитов, приуроченный к первому дню после родов. Для этих родильниц существенным показателем оказалось наличие значительного числа агрегатов из лимфоидных клеток, причем агрегация лейкоцитов отмечалась тоже в первые сутки послеродового периода. При гипогалактии, развивающейся на фоне позднего токсикоза беременности или слабой родовой деятельности, агрегация лимфоидных клеток представлена слабо или совсем отсутствует.

Темпы прохождения молозивного периода, оцениваемые по цитологическому анализу секрета, также оказываются нарушенными — миграция лимфоидных клеток в молоко протекает вяло и сопровождается усиленной десквамацией эпителиальных клеток. Наличие тесной связи между интенсивностью лактации и клеточным составом секрета дает возможность объективно оценивать секреторный процесс в молочной железе и обеспечивает своевременность лечебных мероприятий, направленных на коррекцию лактации. Цитологический анализ секрета молочной железы, применяемый нами в условиях клиники, позволяет обеспечить щадящую диагностику гипогалактии на самых ранних этапах лактации, что, в свою очередь, дает возможность своевременно применить лечебные мероприятия, направленные на стимуляцию лактации.

Рассматривая участие иммунных механизмов в процессах предлактационной подготовки молочной железы, мы должны учитывать, что как гуморальный, так и клеточный иммунный ответ — это комплексный процесс, развивающийся в результате взаимодействия различных типов клеток (В-, Т-лимфоцитов, макрофагов, нейтрофилов и др.) Убедительно показано, что полноценное развитие иммунного ответа требует участия макрофагов в реализации системы трехклеточной кооперации. Участие макрофага состоит в захвате, переработке и предъявлении антигена в иммуногенной форме на клеточной поверхности. Заметим, что антиген, ассоциированный с макрофагом, в 100-1000 раз более иммуногенен, чем нативный антиген.

Функция В-клеток проявляется в формировании антите- лопродуцентов после специфического распознавания антигена. Т-клетки обеспечивают помощь в развитии В-клеточно- го клона посредством секреции медиаторов, роль которых заключается в формировании второго сигнала для В-клеток (Петров Р. В., Михайлова А. А., 1978). Реальной формой проявления клеточной кооперации является прямой физический контакт между макрофагом Т- и В-лимфоцитами (Галактионов В. Г., 1986).

Для клинических исследований, несомненно, важно то, что прямыми предшественниками макрофагов являются моноциты крови. В соответствии с этим мы провели изучение иммунного ответа в связи с подготовкой женщины к лактации. Активность кислой фосфатазы в соматических клетках и моноцитах молозива выявляли гистохимическим методом одновременного сочетания с фосфатом нафтола AS-ТВ и прочным синим ВВ, а также гексазотированным фуксином. Метаболическую и фагоцитарную активность моноцитов оценивали тестом с нитросиним тетразолием. В сыворотке крови и молозиве определяли циркулирующие иммунные комплексы методом преципитации с 3,5%-ным раствором полиэтиленгликоля ПЭГ-тест ОП 280. Уровни IgA, IgG и IgM определяли простой радиальной иммунодиффузией. Функцию моноцитов оценивали по результатам поглощения нитросинего тетразолия, последующего восстановления красителя и превращения его в нерастворимый диформазан.

Полученные результаты свидетельствуют о более высокой функциональной активности моноцитов крови у женщин с нормальной лактацией по сравнению с гипогалактией: процент функционально активных клеток составил 91 ± 7 против 67 ± 13, коэффициент функциональной активности 1,9 ± 0,1 против 1,3 ± 0,2. Существенные различия получены при изучении метаболической активности моноцитов в обследуемых группах. Так, процент метаболически активных клеток был значительно выше у женщин с достаточной лактацией — 69 ± 2,9, чем у страдающих гипогалактией — 59 ± 3,8. Следует также обратить внимание на фагоцитарную функцию — процент фагоцитирующих моноцитов у женщин с нормальной секреторной активностью молочных желез составил 13 ± 1,3, в то время как при гипогалактии 8 ± 2,0.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о более высоком уровне метаболической и функциональной активности моноцитов у женщин с достаточной лактацией по сравнению с гипогалактией.

Исследование активности кислой фосфатазы, являющейся характерным лизосомальным ферментом, показало, что в большинстве секреторных клеток молозива в период лактогенеза обнаруживается активность фермента. Характер реакции зависит от используемого субстрата. Так, при применении гексазотированного фуксина структуры, обладающие ферментативной активностью, окрашиваются в интенсивный красный цвет. Характер реакции преимущественно диффузный. Использование же синего прочного ВВ позволяет более четко определить локализацию кислой фосфатазы, так как продукт реакции выявляется в виде гранул. При изучении уровня активности кислой фосфатазы оказалось, что у женщин с достаточной лактацией активность фермента в эпителиальных клетках была выше, чем у женщин с гипогалактией. Активность кислой фосфатазы также была достаточно высока в макрофагах и моноцитах молозива. Эти клетки демонстрируют резко положительную реакцию в виде цитоплазматического окрашивания, либо гранулярную реакцию при использовании синего прочного ВВ.

При изучении уровней циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови и молозиве были получены следующие результаты. В сыворотке крови они составили 0,07 ± 0,004 и в молозиве — 0,08 ± 0,003. Таким образом, концентрация циркулирующих комплексов была выше в молозиве по сравнению с сывороткой крови, что исключает путь пассивного транспорта их в молочную железу и может свидетельствовать в пользу образования этих компонентов непосредственно в альвеоле молочной железы.

Исследование уровней IgM и IgA показало, что они существенно не отличаются у женщин с различными уровнями лактации. Так, уровень IgM в сыворотке крови и молозиве составил у женщин с достаточной лактацией 1,2 ±0,2 и 1,04 ± 0,6, а у женщин с гипогалактией 1,1 ± 0,3 и 0,97 ± 0,4 соответственно. Анализ концентрации IgA показал, что у женщин контрольной группы в сыворотке крови и молозиве уровень его составил 1,7 ± 0,2 и 3,5 ± 0,8 против 1,6 ± 0,1 и 3,2 ± 0,6 в обследуемой группе. Обращает на себя внимание более высокий уровень иммуноглобулина А в молозиве по сравнению с сывороткой крови, что обеспечивает передачу иммунитета от матери к новорожденному.

При изучении уровня иммуноглобулина G было установлено, что в группе женщин с достаточной лактацией в сыворотке крови и молозиве уровень его был выше и составил

10,1 ± 2,1 и 7,6 ± 1,3 против 7,4 ± 1,3 и 1,4 ± 0,1 соответственно. Причем отмечается статистически достоверная разница между уровнями IgG в молозиве у нормально лактирующих женщин и с гипогалактией.

Из всех цитохимических реакций, которые апробированы на фагоцитах, в настоящее время наиболее широко применяется НСТ-тест (подробнее см. на с. 428), позволяющий раздельно оценить метаболическую и фагоцитарную активность моноцитову которая, по нашим данным, оказалась выше у женщин с достаточной лактацией по сравнению с гипогалактией. Как известно, активация макрофагов сопровождается накоплением и выделением в среду активных форм кислорода, а также пероксидаз. Окислительные системы цитотоксичны для многих клеток. Макрофаги, обладая цитотоксичностью, лизируют нежизнеспособные клеточные структуры, приводят к удалению клеток, которые находятся в полости альвеол при дифференцировке наружного слоя клеток. Более низкая активность моноцитов, установленная в нашем исследовании у части пациенток, существенно снижает темпы морфогенеза в молочной железе, что в конечном результате приводит к гипогалактии. Нами установлена высокая активность кислой фосфатазы в большинстве соматических клеток, а также моноцитах и макрофагах молозива.

В литературе имеются достаточно убедительные сведения об участии лизосомальных гидролаз в процессах программированного лизиса в различных органах, в том числе и молочной железе. Следовательно, полученная высокая активность кислой фосфатазы в клетках молозива подтверждает концепцию участия морфонекротических процессов в образовании полости альвеол. Отторгнутые в этот период клетки могут явиться инициаторами аутоиммунных реакций. В секрете молочной железы в период лактогенеза оказался более высокий уровень циркулирующих иммунных комплексов по сравнению с кровью, что может служить показателем развития иммунной реакции очищения и формирования альвеол молочной железы. Более высокий уровень иммуноглобулина G у женщин с нормальной лактацией, возможно, связан с участием этого класса иммуноглобулинов в образовании циркулирующих комплексов.

Ранее уже отмечалось наличие агрегатов лимфоидных клеток, обнаруженных в молозиве. Вполне очевидно, что этот эффект связан, с одной стороны, с изменением адгезивных свойств клеточных поверхностей, а другой стороны, может явиться проявлением контактного взаимодействия клеток в ходе кооперативного ответа. Для более детального изучения этого вопроса была проведена сканирующая электронная микроскопия молозива женщин. Исследование агрегатов клеток молозива с помощью СЭМ позволяет выявить характерные отличия их формы и рельефа клеточной поверхности. Обращает внимание, что к подложке непосредственно прилегают уплощеные клетки, имеющие слегка волнообразную поверхность. В непосредственном контакте с этими распластанными клетками находятся многочисленные сферические клетки. Для этих клеток, как это видно при большем увеличении микроскопа, характерен складчатый рельеф клеточной поверхности. По этим морфологическим признакам клетки в составе агрегата можно идентифицировать как макрофаги, контактирующие с активированными Т-лимфоцитами.

Особенности реакций клеток иммунной системы при воспалении молочной железы. Наряду с обеспечением процессов морфогенеза молочной железы система иммунного контроля за состоянием органа находится в постоянной готовности и немедленно реагирует при развитии патологических состояний. Лактационный мастит является одним из наиболее частых гнойно-воспалительных заболеваний послеродового периода. В большинстве случаев мастит возникает у кормящих женщин на 2-3-й неделе послеродового периода, когда родильница уже выписана из акушерского стационара. Используемые консервативные методы лечения начальных форм мастита не всегда оказываются эффективными, что приводит к переходу воспаления в гнойную, деструктивную фазу, требующую оперативного вмешательства.

Для эффективного лечения мастита весьма существенно время начала терапии, причем важно осуществить воздействие на доклинической стадии — до подъема температуры тела, появления болезненности и покраснения молочной железы. Важно отметить, что существующие методы не удовлетворяют требованиям практической медицины: они либо требуют сложной, дорогостоящей аппаратуры, не дающей, однако, возможности выявить ранние формы заболевания, либо опасны для здоровья пациентки. Лабораторные методы подсчета форменных элементов крови в молоке весьма трудоемки и мало информативны, поскольку характер цитограмм зависит не только от степени воспаления, но и от кровенаполнения органа, времени и техники сцеживания. Ненадежными и малоинформативными остаются биохимические исследования молока, основанные на изучении щелочно-кислотного равновесия, определения редуктазы и соотношения белков, жиров и углеводов.

Наиболее характерным для воспаления молочной железы процессом является активация системы нейтрофильных лейкоцитов и эозинофилов. Катионные белки, содержащиеся в лизосомах нейтрофильных лейкоцитов, обладают высокой антимикробной активностью и являются медиаторами воспаления. Важно отметить, что исследование катионных белков лейкоцитов, проведение лизосомно-катионного теста и другие способы определения функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов и их бактерицидной активности требуют специального оборудования, обученных специалистов, помещения и т. д. Поэтому данные методы не могут отвечать требованиям, предъявляемым к тестам экспресс- диагностики.

В связи с тем, что у женщин при возникновении воспалительного процесса в молочной железе (мастита) происходит увеличение количества лейкоцитов, уместно было бы использовать для ранней диагностики этого патологического состояния поверхностно-активные вещества. Механизм действия реактивов из поверхностно-активных веществ заключается в том, что в результате разрушения этими веществами ядер клеток, содержащихся в молоке, образуется желе- подобный сгусток. Переходящая при этом в раствор нативная дезоксирибонуклеиновая кислота, которая содержится в ядрах клеток, придает им вязкость (Проба с «димастином» и «Маститопроб»). Явным недостатком этих способов является сложность технологии, достаточно большие сроки выявления воспаления молочной железы, что связано со сложно-

стью трактовки, связанной с оценкой желеобразования в сгустке, определения времени его образования и необходимостью иметь специальные молочно-контрольные пластинки и другое оборудование.

Необходимый для диагностики мастита препарат, предложенный нами, в настоящее время прошел апробацию в ведущих медицинских учреждениях страны, разрешен к применению Комитетом по новой технике М3 СССР (ТУ-42-2-58-91, Код ОКП 93 9816 5894) и серийно выпускается под названием «Диагностикум маститный Диана».

Препарат для диагностики мастита, приготавливается следующим образом: 100 г. стирального порошка «Лотос», состоящего из триполифосфат натрия, сульфанола и едкого натрия, растворяют в горячей воде в 500 мл. Для лучшего растворения смесь подогревают до кипения (кипятят 1 минуту) и затем отстаивают 3-4 часа, после чего фильтруют через марлю. Следует подчеркнуть, что диагностикум не теряет свои свойства в течение 3-5 лет. Диагностику проводят путем смешивания 1 мл молока с 1 мл препарата для диагностики мастита. При наблюдении за состоянием смеси во всех случаях происходило образование желеобразной массы с последующим возникновением сгустка. Время, в течение которого происходят эти процессы, колеблется в пределах от 5 минут до 21 минуты. По этой причине возникают затруднения с интерпретацией процесса желеобразования. Нами был обнаружен новый диагностический признак в оценке нарушений процессов лактации при мастите. Оказалось, что при встряхивании в течение 3- 5 секунд пробирки или пенициллинового флакона, содержащего смесь молока с реактивом, при отсутствии воспалительного процесса в молочной железе над раствором образуется столбик пены. В случае воспалительного процесса в молочной железе (мастит) пена при встряхивании над раствором не образуется. Причем она не образуется даже при более длительном встряхивании. Феномен пенообразования отчетливо возникает после 2-3 минуты после смешивания молока с реактивом.

Были изучены анамнез, особенности течения родов, беременности и послеродового периода у 88 женщин. Из них 20 женщин, страдавших лактационными маститами, составили обследуемую группу. В контрольную группу вошли 68 женщин, у которых послеродового мастита не было. Заболевание началось у 15% пациенток на 6-е сутки послеродового периода, у 20% на 7-е сутки, у 10% на 9-е сутки, у 5%

на 10-е сутки, у 5% на 1-е сутки и у остальных на 3-й неделе после родов. Во всех случаях была поражена одна железа. Наиболее часто в молочных железах поражались верхненаружные квадранты: в правой железе — 80% и левой — 70% случаев. Заболевание маститом сопровождалось повышением температуры до 37,8°С у 33%, от 37,8 до 38°С у 30% и выше 38,1°С отмечено у 33% обследуемых. Средняя продолжительность лихорадки составила 2,6 суток, гиперемия кожи, отек и инфильтрация выявлены у 60% заболевших. Лечение лактационного мастита было комплексным. Оно включало антибактериальную терапию, физиотерапию, витаминотерапию, применение окситоцина. Во всех случаях, где развился послеродовый мастит, при встряхивании пробирки пена над раствором не образовывалась. При физиологическом течении лактации из 68 случаев только в 2 (2,9-2,0%) отсутствовал феномен образования пены. В этих случаях отсутствие феномена пенообразования связано с тем, что секрет исследовался только на 5-е сутки после родов, в конце моло- зивного периода, когда по данным микроскопии в секрете присутствовало большое количество соматических клеток.

Анализ рецепции эстрадиола функциональными ансамблями молочной железы. Несомненно, что начальные стадии ответа репродуктивных органов на гормональные воздействия тесно связаны со специфической рецепцией эстрадиола. Большинство патологических изменений половых органов тесно связаны с нарушениями восприятия гормонального сигнала. Нами проведено авторадиографическое исследование связывания 3Н-17эстрадиола гормонзависимы- ми тканями крысы по методу, предложенному Штумпфом (Stumpf, 1966; 1967; 1968; 1969). Разработав методику замораживания-высушивания срезов и монтирования эмульсии в сухом состоянии, Штумпф полностью исключил возможность диффузии гормона в ткани, и, следовательно, предупредил возникновение артефактов.

В ходе собственных исследований мы отработали ряд методических приемов, направленных на улучшение технологии анализа рецепции. С целью уменьшения расхода меченных эстрогенов мы отказались от введения меченного гормона подопытным животным, а инкубировали эксплантаты матки в капле среды 199, содержащей 3Н-17эстрадиол. Удельная активность гормона составила 50 Т Bk/mM. Инкубацию проводили во влажной камере на миллипоровых фильтрах 1 час при 37°С. Методика инкубирования эксплантатов на плотиках из миллипоровых фильтров адаптирована для различных тканей (молочная железа, гипоталамус). В контрольных образцах создавали 100-кратный избыток немечен- ного гормона. Обработку криостатных срезов и последующее приготовление радиоавтографов с соблюдением всех требований «сухого» варианта метода (Епифанова О. И. и др., 1977) проводили параллельно с исследованием материала, зафиксированного в 10%-ном нейтральном формалине. Эта модификация обоснована работой (Banerjee М. R, 1967), в которой контролировалась потеря радиоактивности меченого Н-кортизола, оказавшаяся минимальной (не более 1%). На наших препаратах мы смогли сравнить автографы, полученные «сухим» и обычным способом, причем выявлено их принципиальное сходство, которое позволило в дальнейшей работе исследовать связывание гормона на фиксированном материале.

Специфичность связывания эстрадиола определяли как разность между общим связыванием при инкубации в среде, содержащей 3Н-17эстрадиол, и связыванием при инкубации в среде, содержащей, кроме меченного гормона, 100-кратный избыток немеченного эстрадиола. Анализируя локализацию метки в различных клетках гормонзависимых органов, мы выяснили, что в железистом эпителии матки меченых клеток больше, чем в миометрии, а специфическое связывание эстрадиола у андрогенстерильных крыс (дефектных в отношении рецепции эстрогенов) оказалось, как и следовало ожидать, значительно ниже, чем у интактных крыс.

Уриель с сотрудниками (Uriel et al., 1973) предложил метод, основанный на высоких константах ассоциации стероидов с клеточными рецепторами. Особенностью предлагаемого метода явилось взаимодействие эстрогена и рецептора непосредственно на фиксированном гистологическом препарате. Удаляя в процессе промывки несвязавшийся гормон, выявляют структуры, обладающие значительным сродством к гормону, причем предварительная подготовка препарата (фиксация в абсолютном этаноле, заливка в парафин, депарафирование срезов), по мнению авторов, обеспечивает удаление эндогенных стероидов, маскирующих часть рецепторов.

Определение рецепции эстрогенов методом Уриеля показало, что у андрогенстерильных крыс связывание меченого гормона существенно меньше, чем у интактных животных. Помимо этого обнаружено значительное снижение количества зерен восстановленного серебра, не связанных с клетками, которые мы рассматриваем как «фон*. Сниженный «фон* по сравнению с препаратами, полученными по методу Штумпфа, позволил провести морфологический анализ клеток, связывающих эстрадиол, и разделить их на интенсивно и неинтенсивно меченые клетки. У андрогенстерильных крыс выявлено существенное снижение рецепции гормона вплоть до полного исчезновения метки в эндометрии и в миометрци. У интактных крыс имеется большое число интенсивно меченых клеток, расположенных в lamina propria. Степень связывания эстрадиола настолько высока, что количество зерен восстановленного серебра не поддается подсчету. По данным морфологического исследования параллельных срезов с этих же образцов ткани, интенсивно меченные клетки можно отнести к эозинофилам, переходящим из сосудов в подслизистый слой ткани матки в периоды гиперэстрогении. Подсчет количества меченых клеток позволил оценить степень связывания меченого гормона в различных отделах матки.

Таким образом, метод Уриеля позволяет не только подтвердить уже имеющиеся данные, но и получить дополнительные сведения об особенностях связывания меченного эстрадиола в эозинофилах, временно локализующихся в тканях матки. Применение экспериментальной модели со сниженной рецепцией (андрогенстерильных крыс) позволило убедиться в работоспособности метода. Метод Уриеля наиболее удобен для работы в клинических условиях. Получение в день операции небольшого количества образцов, их фиксация и заливка в парафин позволяют накопить для инкубации большое количество материала разного времени и тем самым рационально использовать меченные соединения, а также проводить работу на однородно обработанном материале. Несомненным достоинством метода Уриеля является возможность одновременной оценки рецепции и анализа гистологической структуры. Вот почему для решения вопроса, зависит ли чувствительность к эстрадиолу ткани молочной железы женщин от степени патологических измененийу мы воспользовались этим методом.

Материал для исследования получен при оперативном удалении молочной железы в клинике Института онкологии АМН. Одновременно с авторадиографическим исследованием рецепцию эстрадиола определяли биохимическим методом в цитозольной фракции. Для морфологического анализа использованы параллельные срезы из блоков, подготовленных для авторадиографии. Исследование клинического материала, как правило, связано со значительной вариабельностью данных вследствие использования разных методик. При сопоставлении результатов биохимического исследования рецепции эстрадиола и данных авторадиографического анализа можно отметить общую тенденцию — увеличение связывания гормона со специфическими рецепторами в тканях опухолевого узла по сравнению с неизмененной тканью. Сопоставление различных характеристик ткани (содержание соединительнотканных элементов, размеров клеток и ядер) с уровнем рецепции эстрогенов дает возможность более полно оценить степень патологических изменений и вплотную подойти к анализу патогенеза гормонзависимых новообразований молочной железы. При анализе причин нарушения нормальных морфогенетических процессов приходится задумываться над таким вопросом: почему при генерализованном воздействии гормонов и широком распространении рецепторов в гормонзависимых тканях возможен неконтролируемый патологический рост новообразований молочной железы? Не претендуя на раскрытие патогенетических механизмов канцерогенеза, мы должно отметить, что именно при нарушении свойственной для нормальной молочной железы альвеолярной структуры существенно возрастает специфическая рецепция эстрогенов и соответственно гормональная зависимость опухоли.

Обращает на себя внимание то, что при высоких значениях специфического связывания эстрадиола интенсивно меченные клетки располагаются в виде тесного скопления, а при известной «нормализации» структуры органа можно отметить и снижение рецепции эстрогенов. Несомненный интерес представляет рецепция эстрадиола клетками альвеолярного отдела молочной железы в период лактации. Естественно, что такой материал можно получить только в экспериментальных условиях (мы изучали молочную железу лактирующей белой мыши). В период интенсивного секретобразования в середине лактации получен биопсийный материал и обработан по описанной выше методике Уриеля. Как показало авторадиографическое исследование, в альвеолах молочной железы происходит интенсивное связывание меченного эстрадиола железистыми клетками и клетками лимфоидного ряда, локализованными в полости альвеолы. Интенсивность связывания метки при стандартных сроках экспозиции настолько высока, что концентрация восстановленных зерен серебра не позволяет рассмотреть структуру клеток молочной железы. Снижение сроков экспозиции позволеют рассмотреть детали распределения метки в клетках железистого эпителия. Зерна восстановленного серебра обнаруживаются над ядрами и цитоплазмой секреторных клеток. Обнаружены также многочисленные гранулы серебра, выстраивающиеся над клеточной границей, что можно интерпретировать как показатель мембранного связывания эстрадиола.

Вместе с тем остановимся на интенсивно меченных лимфоидных клетках в полости альвеолы. Рассматривая перо- ксидазу в ряду цитотоксических факторов (Szeso, 1972), необходимо учитывать, что отмеченный нами выше высокий уровень содержания этого фермента характерен для лейкоцитов молозива и молока нормально лактирующей женщины. Снижение ферментативной активности в условиях гипо- галактии можно рассматривать как следствие нарушения гормональной регуляции процесса становления лактации, поскольку известно, что пероксидаза принадлежит к ферментам, индуцируемым действием эстрогенов. Важной особенностью действия эстрогенов на репродуктивные органы является именно индукция пероксидазной активности эпителиальных клеток эндометрия и проникновение в ткань матки гранулоцитов, содержащих миелопероксидазу. По данным авторадиографического анализа, и в других эстрогензависи- мых органах происходит наиболее значительное связывание меченного эстрадиола этими же клетками (Uriel et al., 1973).

При нормальном течении беременности наступлению родового акта предшествует увеличение содержания эстрогенов. У женщин, страдающих поздним токсикозом беременности, основным патогенетическим фактором, обусловливающим неадекватную функцию матки, является нарушение синтеза эстрогенов в фетоплацентарном комплексе. С этим, очевидно, и связано отсутствие соответствующей реакции молочной железы, которая обеспечивает индукцию перокси- даз. Известно, что при повышении содержания эстрогенов, гранулоциты имбибируют ткани репродуктивных органов и молочной железы, а в последующем удаляются из организма (Tchernitchin, Galand, 1983; Chan, Shyamala, 1983). Можно думать, что интенсивно связывая эстрогены, лейкоциты принимают участие в снижении уровня стероидных гормонов и удалении их из организма. При подавлении продукции эстрадиола и нарушении гормонального влияния на молочную железу не развивается и реакция лимфоидных клеток. Весьма существенно то, что при определении уровня половых гормонов у кормивших и некормивших грудью женщин в первые 1,5 месяца после родов, выявлена существенная разница в содержании именно эстрадиола, а не прогестерона (Nevill, 1983). Отмечена высокая достоверность (р < 0,01) низших значений концентраций эстрадиола у женщин, кормивших грудью, по сравнению со значительно более высокими концентрациями гормона у не кормивших своих детей женщин. Возможно, что удаление «излишнего» эстрадиола в ходе лактации является одним из факторов снижения риска онкологических заболеваний при условии полноценного грудного вскармливания.

Таким образом, роль процессов межклеточной интеграции в этот период сводится к формированию специфически построенного клеточного комплекса, деятельность которого обеспечивает быстрое удаление «ненужного» клеточного и гормонального материала. В ходе гормонзависимых морфонекротических процессов нами выявлены потенциальные возможности различных по происхождению клеток, способных специализироваться в одном направлении для осуществления цитотоксических реакций. На этом этапе возможна временная дифференцировка клеток секреторного эпителия, образование в клетках мощного протеолитического аппарата, а также направленная миграция клеток иммунной системы — все это призвано ускорить удаление лишних клеток из просветов альвеол и протоков. Изложенные в настоящей главе данные раскрывают значение гор- монзависимых изменений в формировании специфической структуры и вовлечении железистых образований в функционально активное состояние.

 
Посмотреть оригинал
Если Вы заметили ошибку в тексте выделите слово и нажмите Shift + Enter
< Предыдущая   СОДЕРЖАНИЕ   Следующая >
 

Популярные страницы