Исследование на «скрытую» кровь

Для определения так называемых «скрытых» кровотечений предложено большое число различных методов; некоторые из них очень сложны. Практическое применение нашли главным образом следующие реакции.

  • 1. Гваяковая проба. К 5—10 см3 нефильтрованного желудочного содержимого или жидких испражнений (при твердом кале кусочек с лесной орех растирают в ступке с 5 см3 воды) прибавляют 1—2 см3 ледяной уксусной кислоты для перевода гемоглобина в кислый гема- тин; после этого при многократном осторожном переворачивании пробирки смесь экстрагируют равным объемом эфира. Эфир сливают в другую пробирку и прибавляют к нему 10 капель свежеприготовленного алкогольного раствора гваяковой смолы (щепотка смолы на 5 см3 алкоголя) и 20 капель 3 % перекиси водорода или такое же количество озонированного старого, стоявшего на воздухе скипидара. При наличии крови на границе двух слоев жидкости появляется лиловая или темно-синяя окраска. Эта проба мало чувствительна, показывая содержание крови лишь при 5—10 % ее в исследуемой жидкости. Она находит применение в тех случаях, где ставят себе целью определить наличие больших примесей крови к испражнениям.
  • 2. Значительно более чувствительной является бензидиновая проба по Адлер — Вагнеру.

Взятую из середины кала частицу величиной с горошину растирают на предметном стекле. После этого растворяют щепотку бензидина в 2 см3 ледяной уксусной кислоты и прибавляют 15—20 капель 3 % перекиси водорода. Несколько капель полученного реактива наливают на растертый на стекле кал. При наличии скрытой крови появляется тотчас же ( + + ) или через несколько минут (+) синевато-зеленое окрашивание. В таком виде реакция чрезвычайно чувствительна и улавливает кровь в разведении 1 : 500 000; по некоторым авторам она даже у здоровых людей и при достаточно длительной безмясной диете дает положительные результаты благодаря наличию в стуле катализаторов растительного происхождения.

  • 3. Менее чувствительной, но более точной является модификация Гре- герсена. Принцип этого способа — применение определенной концентрации раствора бензидина (1/2 %), благодаря чему чувствительность реакции снижается, до имеющего практическое значение содержания крови 1 : 500. Берут свежеприготовленный раствор 0,025 г бензи- дина+ОД перекиси бария в 5 см3 50 % уксусной кислоты и наливают 1—2 капли на тонкий мазок из испражнений (на предметном стекле). При наличии крови получается синее или зеленое окрашивание. Предложенная Грегерсеном замена перекиси водорода перекисью бария (ОД) необязательна.
  • 4. Пирамидоновая проба предложена Тевеноном и Роланом (Thevenon et Rolland). Кусочек испражнений величиной с горошину растирают в ступке с 4 см3 дистиллированной воды, жидкость сливают в пробирку, прибавляют 8 капель 50 % уксусной кислоты и равное полученному объему количество раствора пирамидона [Pyramidoni 2,5, Spiriti vini (90 %) 50,0]. После этого приливают 6—8 капель 3 % перекиси водорода. Пробирку встряхивают. При наличии крови получается лиловое или фиолетовое окрашивание. Особых преимуществ этот метод перед бензидиновой пробой не имеет, наоборот, он даже менее чувствителен.

Прекрасным методом определения скрытых кровотечений является исследование спектроскопом по Снаперу (на гематин и гемопорфи- рин).

  • 5. Метод Снапера. Несколько граммов кала растирают в ступке с избытком ацетона, фильтруют, осадок вновь промывают ацетоном и переносят в чистую ступку, где растирают со смесью из одной части 50 % едкого кали, одной части пирамидона и 2,5 частями алкоголя. К нескольким кубическим сантиметрам экстракта приливают А—5 капель сернистого амония и спектроскопируют. При незначительном содержании крови видна одна полоса поглощения при X 560, при более значительном — еще одна между X 523 и X 526.
  • 6. За последнее время Боас, исходя из положения, что нормально испражнения практически не содержат дейтеропорфирина или только совершенно ничтожные следы его, предложил для распознавания «скрытых» кровотечений определять наличие в них дейтеропорфирина. Методика эта состоит в следующем: 30—50 г исследуемых испражнений растирают в абсолютно чистом ацетоне для удаления стеркоби- лина, фильтруют, высушивают на фильтре; полученный порошок растирают в уксуснокислом эфире в разведении 1 : 3 и вновь фильтруют; прозрачный фильтрат смешивается с 5 см3 0,1 % раствора соляной кислоты, затем встряхивают его с 3 см3 0,5 % раствора НС1 и определяют спектроскопически наличие дейтеропорфирина, дающего в спектроскопе полосу при X 590—600[1].

  • [1] J. Boas. Klin. Woch., стр. 1052, 1932, u. Arch. f. Verdauungskr., Bd. 53, № 1—2, 1933.
 
Посмотреть оригинал
< Пред   СОДЕРЖАНИЕ   ОРИГИНАЛ     След >