РАЗРАБОТКА КРИТЕРИЕВ И ПРОГНОЗИРОВАНИЕ ИНДИВИДУАЛЬНОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ И РАДИОРЕЗИСТЕНТНОСТИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПОКАЗАТЕЛЕЙ РЕГУЛЯТОРНЫХ СИСТЕМ ОРГАНИЗМА
Индивидуальные характеристики гормонального статуса животных при воздействии острой гипобарической гипоксии и облучения
Проводилось экспериментальное исследование механизмов неспецифической индивидуальной резистентности системы гормональной регуляции при тестирующем нерадиационном (острой гипобарической гипоксии) и радиационном воздействиях.
Целесообразность оценки индивидуальных особенностей гормональной системы при исследовании неспецифической реактивности и резистентности организма определяется ее важной ролью среди регуляторных систем. Еще в работах Г. Селье (1960, 1972) и затем других исследователей (Бетц, 1961; Мороз, Кендыш, 1975; Нейман, 1964; Гаркави и др., 1977) была показана ведущая роль системы гипотала- мус-гипофиз-кора надпочечников в формировании реакции организма на действие экстремальных факторов, а также существенная роль эндокринной системы в поддержании гомеостаза и в процессе адаптации организма к воздействию факторов окружающей среды (Гаркави и др., 1977; Даренская, Кузнецова, 1967). Показатели эндокринного статуса успешно использовались и в разработке методов прогнозирования индивидуальной радиочувствительности (Короткевич, 1967, 1986).
Схема опыта была следующей.
- 1. Тестирование экспериментальных животных и разделение их на группы по индивидуальной резистентности к тестирующему воздействию (гипобарической гипоксии).
- 2. Нагрузочные воздействия: стандартная гипоксическая нагрузка и гамма-облучение в дозе LD50/30.
3. Определение содержания гормонов кортизола, тестостерона, тироксина и трийодтиронина в сыворотке крови животных экспериментальных групп.
Опыты проводились на 200 взрослых самцах крыс линии Вистар массой 200—250 г. В эксперименте с исследованием гормонов было использовано 120 животных (по 8—10 контрольных и опытных крыс в каждой из 6 экспериментальных групп).
В качестве тестирующей нагрузки при исследовании неспецифической резистентности экспериментальных животных, как и на предыдущих этапах исследований, использовали острую гипобарическую гипоксию. Критериями устойчивости к ней служили показатели времени сохранения рефлекса позы (ВСРП) и времени восстановления рефлекса позы (ВВРП) при подъеме крыс на «высоту» 11200 м.
По результатам тестирования для определения нейрогормональ- ного статуса из 200 животных было отобрано по 8—10 крыс каждой экспериментальной группы: низкоустойчивых (НУ), нормо- или среднеустойчивых (СУ) и высокоустойчивых (ВУ). Контрольные животные содержались в тех же условиях и подвергались тем же воздействиям, кроме тест-нагрузок, что и подопытные.
После отбора по показателям неспецифической реактивности и устойчивости к гипоксии половина подопытных животных была подвергнута стандартной гипоксической нагрузке — пребывание в барокамере на «высоте» 10000 м в течение 1 мин. Сразу после извлечения из барокамеры животных забивали и исследовали содержание гормонов в сыворотке крови.
Другую часть подопытных животных облучали на гамма-облучатель- ской установке «Алмаз» с мощностью дозы 26,35 сГр/мин. Радиационное воздействие осуществлялось в дозе 820 сГр, соответствующей 50 % вероятности гибели (LD50/30, экспериментально определенная для данной популяции). По техническим условиям эксперимента у этих животных определение гормонов производилось через 3 часа после воздействия.
Для определения содержания гормонов контрольных и подвергшихся тестирующему воздействию крыс декапитировали, собирали вытекающую из тушки кровь. Пробирку с собранной кровью выдерживали при комнатной температуре в течение 60 мин. для образования сгустка. Затем края сгустка «обводили» стеклянной палочкой и выдерживали пробы в холодильнике при -4° С для более полной ретракции сгустка. После этого пробы центрифугировали 10 мин. при 1700 g, сыворотку переливали в другую пробирку и центрифугировали повторно в том же режиме для более полного осаждения эритроцитов. Образцы сыворотки хранили при -40°С.
Концентрацию гормонов определяли радиоиммунологическим методом с использованием РИА-наборов производства «Белорис» и «ИБОХ БАН» (Белоруссия). Радиоактивность проб подсчитывали на колодезном гамма-счетчике УГС-1. Результаты обрабатывали статистически с использованием непараметрического [/-критерия Вилкоксона-Манна- Уитни и t-критерия Стьюдента.