Методы микроскопического исследования. Забор, фиксация, обработка, исследование, хранение материала для судебно-гистологического исследования. Типичные ошибки при исследовании гистологического материала. Описание микропрепаратов

На современном этапе развития судебной медицины применяются разнообразные методики микроскопического исследования:

  • — микроскопическое исследование в падающем свете;
  • — микроскопическое исследование в проходящем свете;
  • — поляризационная микроскопия;
  • — фазово-контрастная микроскопия;
  • — интерференционная микроскопия;
  • — флуоресцентная микроскопия;
  • — микроскопическое исследование в ультрафиолетовых лучах;
  • — микроскопическое исследование в инфракрасных лучах;
  • — электронная микроскопия.

Для исключения артефактов и формирования полных суждений эксперты должны строго следовать правилам забора, фиксации, обработки, исследования, хранения и документации трупного материала, предназначенного для судебно-гистологического исследования.

Судебно-медицинский эксперт, вскрывавший труп, вместе с материалом в гистологическое отделение направляет сопроводительный документ с указанием в нем следующих данных: фамилии, имени, отчества, пола и возраста умершего, времени наступления смерти, номера и даты исследования трупа, обстоятельств дела, судебно-медицинского диагноза, описания макроскопического вида органов и тканей, из которых взяты кусочки, необходимости специальных гистологических окрасок, целей гистологического исследования.

Особенности взятия объектов для производства судебно-гистологической экспертизы

Согласно «Порядку организации и производства судебно-медицинских экспертиз в государственных судебно-экспертных учреждениях Российской Федерации» определена следующая последовательность действий:

«72.1. В обязательном порядке производится взятие объектов трупа и его частей и направление их для судебно-гистологической экспертизы в случаях убийств, производственных травм, отравлений (в том числе алкоголем), поражений техническим электричеством, смерти от действия низкой температуры внешней среды, при скоропостижной смерти детей и взрослых, при смерти от инфекционных заболеваний (в том числе от туберкулеза), онкологических и гематологических болезней, ятрогенных заболеваний, в случаях наступления смерти в организациях здравоохранения.

  • 72.2. Взятие объектов (органов и тканей) трупа для проведения судебно-гистологической экспертизы осуществляет эксперт, производящий экспертизу трупа и его частей.
  • 72.3. Кусочки органов и тканей трупа (его частей) вырезают острым ножом, пользоваться ножницами во избежание размятия тканей не рекомендуется. Нельзя скоблить поверхность кусочков, особенно слизистую и серозную оболочки. Рыхлые, легко распадающиеся ткани и массы (например, содержимое полости матки) берут на нож, не пользуясь пинцетом, и погружают в фиксирующую жидкость в марлевом мешочке.

Кусочки вырезают толщиной 0,5—1 см, длина и ширина может быть различной (обычно 1 х 1,5 см или 1,5 х 2 см) с таким расчетом, чтобы получаемый срез поместился под стандартное покровное стекло. Кусочки сразу же помещают в фиксирующую жидкость. Ввиду медленного ее проникновения в глубину ткани взятие на исследование более толстых кусочков не рекомендуется.

При взятии кусочков разрезы органов следует производить так, чтобы лучшим образом было видно их анатомическое строение. Например, в кусочке почки должны быть представлены корковое и мозговое вещество, в очаге пневмонии — центральный и периферические участки. При механических и иных повреждениях необходимо изымать место повреждения с прилежащими здоровыми тканями.

72.4. При необходимости дать оценку каждого из имеющихся в одном и том же органе или ткани изменений их маркируют этикеткой. Подпись на этикетках делают черным графитовым карандашом. Для этикеток используют материал, устойчивый к действию фиксирующей жидкости (клеенку, фотобумагу и др.).

72.5. Вырезанные кусочки помещают в 10—15%-й раствор формалина. Его готовят из концентрированного раствора параформальдегида, добавляя к одной его части девять частей воды. Использовать параформальдегид с белым осадком не следует. В таких случаях исходный концентрированный раствор помещают в вытяжной шкаф и подогревают до растворения осадка, после чего его можно использовать.

При необходимости использования нейтрального раствора формалина его готовят следующим образом: раствор формалина (37— 40%-й) — 100 мл, вода дистиллированная — 900 мл, однозамещенный фосфат натрия — 4 г, безводный двузамещенный фосфат натрия — 6,5 г.

  • 72.6. Объем фиксирующей жидкости должен превышать объем кусочков не менее чем в 10 раз. При этом следят, чтобы кусочки в растворе не слипались и не прилегали ко дну банки. Для этого на дно банки кладут слой ваты и раствор периодически взбалтывают. Во избежание подсыхания всплывших кусочков сверху их прикрывают ватой. Фиксацию в формалине проводят при комнатной температуре в течение 1—2 сут. Через одни сутки раствор меняют. Более длительная фиксация нежелательна.
  • 72.7. Для фиксации нервной ткани при применении специальных окрасок используют нейтральный раствор формалина. Для некоторых методик (например, окраска на гликоген) кусочки фиксируют в 96%-м растворе этанола.
  • 72.8. Частицы высохших тканей собирают в пакет и направляют в судебно-гистологическое отделение в нефиксированном виде. Таким же образом направляют кусочки от мумифицированных трупов и трупов в состоянии торфяного дубления или жировоска.
  • 72.9. Подготовку фиксированных кусочков органов и тканей для судебно-гистологической экспертизы (вырезку) выполняет эксперт, производящий экспертизу трупа и его частей. Оставшийся после вырезки материал собирают в маркированный марлевый мешочек и помещают его в плотно закрывающийся сосуд со свежим раствором формалина, хранящийся в течение одного года.
  • 72.10. Количество кусочков, взятых из тех или иных органов и тканей, определяется выраженностью и распространенностью патологического процесса, а также задачами исследования.
  • 72.11. При подозрении на определенный вид смерти необходимо дополнительно исследовать, наряду с другими, следующие органы и ткани из трупа и его частей:
    • — при механической асфиксии — странгуляционную борозду, из которой кусочки вырезают так, чтобы в них попали дно, нижний и верхний краевые валики с неповрежденной тканью (если борозда широкая, то можно вырезать два кусочка так, чтобы в них были представлены верхний краевой валик и дно, нижний краевой валик и дно);
    • — при смерти от местного действия высокой температуры — кусочки кожи из области ожога, трахею, главный бронх, легкие, почки;
    • — при смерти от действия низкой температуры — желудок, двенадцатиперстную кишку, поджелудочную железу, сердце, легкие;
    • — при черепно-мозговой травме — кусочки головного мозга с мягкими мозговыми оболочками из контузионного очага и пограничной зоны, а также из ствола мозга, твердую мозговую оболочку (по показаниям);
    • — при субарахноидальных (особенно базальных) кровоизлияниях — артерии основания головного мозга различного калибра из мест, где наиболее часто локализуются патологические изменения и врожденные пороки развития;
    • — при отравлениях прижигающими ядами — язык, пищевод, желудок, тонкий кишечник, верхние дыхательные пути, почки, печень;
    • — при отравлении фосфорорганическими соединениями — легкие, сердце, почки, печень, надпочечник;
    • — при определенных показаниях — кожу с ПЖК и мышцами из мест введения лекарственных и наркотических веществ;
    • — при подозрении на внебольничный аборт — матку, яичники, трубы, стенку влагалища, параметральную клетчатку;
    • — при подозрении на смерть от острой коронарной недостаточности — венечную артерию в месте наибольших изменений, мышцу сердца по краю ишемизированных и полнокровных участков через всю толщу стенки;
    • — при внезапной смерти лиц молодого возраста в условиях чрезмерной физической нагрузки, психической травмы или иных стрессовых воздействий, а также когда причина смерти не ясна — гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковую систему, органы иммуногенеза, мазки-отпечатки слизистых оболочек дыхательных путей;
    • — при подозрении на СПИД — головной и спинной мозг, печень, почки, желудок, кишечник, органы иммуногенеза (костный мозг, вилочковую железу, лимфатические узлы различной локализации, селезенку), а при показаниях — сетчатку глаза, кожу, слизистую оболочку рта и др.
  • 72.12. При скоропостижной смерти детей грудного и раннего возраста на исследование, наряду с другими органами и тканями, направляют:
    • — часть гортани с голосовыми связками и региональными лимфатическими узлами;
    • — три кусочка трахеи — начальную часть (вместе с участками щитовидной железы для ориентации об уровне трахеи), среднюю
  • (с паратрахеальными лимфатическими узлами) и область бифуркации (с начальными отделами обоих главных бронхов);
  • — внелегочные бронхи и кусочки из области корня легких с пе-рибронхиальными лимфатическими узлами;
  • — ткань легких из участков с максимально и умеренно выраженными изменениями;
  • — стенку глотки, миндалины с дужками, слюнные железы;
  • — мазки-отпечатки слизистой оболочки гортани, трахеи, бронхов, поверхности разрезов легких;
  • — центральные и периферические органы иммуногенеза (вилочковую железу, лимфатические узлы, селезенку, лимфоидную ткань желудочно-кишечного тракта);
  • — сердце с клапанным аппаратом;
  • — печень;
  • — кору головного мозга с мягкими мозговыми оболочками, субэпендимарные отделы головного мозга;
  • — тонкий и толстый кишечник;
  • — надпочечники.
  • 72.13. При исследовании трупов новорожденных надлежит брать легкие, сердце, почки, печень, вилочковую железу, надпочечники, пупочное кольцо с сосудами, родовую опухоль, плаценту.
  • 72.14. При направлении материала в судебно-гистологическое подразделение ГСЭУ[1], помимо сведений об умершем, данных исследования трупа (макроскопическая характеристика органов и тканей, предварительный диагноз), в сопроводительном документе указывают наименование объектов, количество кусочков — общее и по органам и тканям, способ фиксации и цель судебно-гистологической экспертизы».

  • [1] ГСЭУ — государственные судебно-экспертные учреждения.
 
Посмотреть оригинал
< Пред   СОДЕРЖАНИЕ   ОРИГИНАЛ     След >